探討紅外分光光度計(jì)的常用波長(zhǎng)
紅外分光光度計(jì)廠家的分光光度計(jì)是利用分光光度法，通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。不同種類的分光光度計(jì)的基本原理相似，都是利用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源。光源透過測(cè)試的樣品后，部分光源被吸收，通過測(cè)量樣品的吸光值，經(jīng)過計(jì)算可以轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
紅外分光光度計(jì)常見用途和波長(zhǎng)有哪些？
1.核酸定量
核酸的高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260 nm。利用260nm的波長(zhǎng)可以定量測(cè)量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA的濃度。
除了核酸濃度，分光光度計(jì)同時(shí)顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度。如A260/A280的比值，用于評(píng)估樣品的純度，因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?80nm。純凈的樣品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或2.0，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。
A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。
A320檢測(cè)溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品，A320一般是0。
2.蛋白質(zhì)直接定量
這種方法是在280nm波長(zhǎng)，直接測(cè)試蛋白。選擇Warburg公式，光度計(jì)可以直接顯示出樣品的濃度，或者是選擇相應(yīng)的換算方法，將吸光值轉(zhuǎn)換為樣品濃度。
3.細(xì)菌細(xì)胞密度
細(xì)菌培養(yǎng)過程中，需要采用分光光度計(jì)準(zhǔn)確測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。
追蹤液體培養(yǎng)物中微生物生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)方法在600nm波長(zhǎng)下，以未加菌液的培養(yǎng)液作為空白液，測(cè)量定量培養(yǎng)后的含菌培養(yǎng)液。
